轉基因小鼠對黑色素瘤發生的分子途徑的理解有重要意義。此外，轉基因小鼠是可靠且可重現的模型，用來評估受損基因對黑色素瘤生物學的影響。應用：基因工程小鼠模型可用于研究特定基因組改變在黑色素瘤的發生和發展的重要性及藥物的靶向。1Lum－/－基因敲除小鼠Lumican是一種富含亮氨酸的小蛋白聚糖(smallleucine-richproteoglycan，SLRP)，為膠原原纖維形成的關鍵調節劑。黑色素瘤中Lumican表達降低與浸潤相關。方法：有研究者利用BamHI建立的克隆衍生物導入胚胎干細胞，建立Lum－/－轉基因小鼠。該模型可提供與發生和轉移相關機制及可見變的進展，以及確定負責的黑色素瘤進展的基因。2Tyr::N-RasQ61K轉基因小鼠方法：有研究者使用突變的人N-ＲasQ61K和SV40剪接以及聚腺苷酸化序列生成Tyr::N-ＲasQ61K構建體，并注射到卵母細胞中，建立Tyr::N-ＲasQ61K轉基因小鼠。3BrafV600E轉基因小鼠模型有研究者使用LoxP-stop-LoxP(LSL)/Cre重組酶技術從內源性Braf基因中誘導BrafV600E表達，建立BrafV600E轉基因黑色素瘤小鼠模型。總結目前已有三種不同的黑色素瘤小鼠模型，但由于實驗動物與人類基因組、基因調控、細胞類型、結構與組成等方面是有一定差別。因此，外科結扎膽總管并使膽總管完全阻塞已成為引起嚙齒動物梗阻性膽汁淤積性損傷的常用模型。湖南小鼠動物模型

本實用新型屬于動物實驗設備技術領域，具體涉及一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統。背景技術：高原環境模擬系統可以在非高原地區“制造”出不同海拔高度和氣候條件，模擬各種高原缺氧環境，使實驗動物在一定時間內根據實驗需求達到預期的高原反應癥狀，使實驗動物表現出高原性疾病，為高原疾病研究人員提供高原疾病模型動物，便于研究或預防高原性疾病的藥物。現有的環境模擬系統可以模擬實現高原光照和低氧環境，但模型成功率較低、動物死亡率較高、造模動物種類單一。技術實現要素：本實用新型的目的在于：提供一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統，解決現有高原環境模擬系統中存在的模型成功率較低、動物死亡率較高、造模動物種類單一的問題。本實用新型采用的技術方案如下：一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統，包括功能設備集成底座和設置在功能設備集成底座上的飼養倉，所述飼養倉具有無極調控微負壓裝置、高原低氧環境模擬裝置、高原光照環境模擬裝置、高原溫度環境模擬裝置、高原濕度環境模擬裝置、動物行為學遠程觀察單元，所述飼養倉內設置有若干代謝籠，飼養倉前后箱體上設置有觀察窗和若干操作窗。江蘇模式動物模型服務高脂飼料致高脂血癥大鼠模型。

省心省時一些基因編輯鼠模型表型不易發現，需要結合外科手術造模、物理刺激或藥物誘導才能發現表型。專業的手術模型團隊結合成熟穩定的基因修飾鼠平臺和飼養繁育平臺，賽業生物可為您提供一站式“基因編輯鼠模型制備——種群擴繁——手術造?！硇万炞C”服務，讓您省心省時。3.專業的技術支持賽業生物專業的小動物外科手術團隊熟練掌握多種模型的制備，具備建立復雜及復合手術疾病模型的能力，可能夠根據您的需求，制定合理的實驗計劃，同時提供及時的項目匯報與售后服務，讓您省事省心。，確保動物福利與質量標準與國際接軌賽業模式動物中心通過ISO9001:2015和AAALAC雙認證，ISO9001:2015認證確保向廣大學者提供的所有產品和技術服務符合國際標準，AAALAC認證表明了賽業生物尊重動物福利和倫理，重視生物安全的負責態度。適用動物品種：大鼠、小鼠。手術疾病模型團隊首席科學家簡介張榮利博士張榮利博士有二十多年小鼠手術疾病模型制備經驗，畢業后先后在中國中醫科學院、清華大學、北京大學及國際學術機構任職，2011年起在美國CaseWesternReserveUniversity工作，任ResearchScientist并擔任心血管生理學實驗室主任，負責基因工程動物的疾病表型發現與新藥臨床前研究。

所述外顯子序列為第3外顯子序列。進一步地，在本發明的一些實施方案中，利用cre-loxp基因敲除技術敲除gm20541基因上的第3外顯子序列。上述敲除策略是采用cre-loxp敲除技術敲除gm20541基因。但在其他的實施例中，實現基因敲除的技術手段有很多，例如crispr/cas9技術、人工核酸酶介導的鋅指核酸酶技術(zinc-fingernucleases，zfn)、轉錄因子樣效應物核酸酶技術(transceriptionactivator-likeeffectornucleases,talen)等。因此，在其他的實施例中采用crispr/cas9技術或其他的技術手段敲除gm20541基因，也是屬于本發明的保護范圍。進一步地，在本發明的一些實施方案中，所述目標動物為哺乳動物。進一步地，在本發明的一些實施方案中，所述哺乳動物選自小鼠、大鼠、狗、豬、猴以及猿中的任意一種。需要說明是，本發明所述的目標動物并不限于上述的動物，其他類型的哺乳動物也是可行，無論選用何種動物，只要是具有gm20541基因或其同源基因的動物，均可作為本發明所述構建方法中的目標動物，在其前體細胞中敲除gm20541基因，使其表現出視網膜色素變性性疾病特征，作為視網膜色素變性疾病模型，這也是屬于本發明的保護范圍。第二方面。面神經受損而致面部表情肌群的運動功能障礙,對患者的心理和日常生活造成很大的影響。

e：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網膜電圖b波統計；scotopicamplitude：暗光測定峰值；flashintensity：閃光強度；a-wave：a波；b-wave：b波。圖6：光適應視網膜電圖(erg)檢測結果；圖中：a-b：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網膜電圖軌跡圖；c：20cd·s/m2光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應閃爍(flicker)視網膜電圖軌跡圖；d：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網膜電圖a波統計；e：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網膜電圖b波統計；f：20cd·s/m2光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應閃爍(flicker)視網膜電圖統計。sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子。圖7：視網膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠視網膜切片免疫組化染色結果；小鼠年齡：4個月；os：outer-segment(外節)；is：inner-segment(內節)；onl：outernuclearlayer(外核層)；inl：innernuclearlayer(內核層)；圖中：a：視網膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠視網膜石蠟切片的h&e染色結果，外核層及內核層均變??；b：對不同部位的gm20541敲除鼠視網膜外核層厚度統計。圖8：視網膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠ihc染色結果。故大腦中動脈阻塞(MCAO)模型被用于局灶性腦缺血的研究。上海乳鼠動物模型飼養

大腦中動脈(MCA)為臨床上發生腦缺血損傷常見的部位之一。湖南小鼠動物模型

微波爐中融化后制成1％的瓊脂糖膠。取10μlpcr產物于加樣孔中，120v恒壓瓊脂糖電泳15min.用凝膠成像系統成像。圖4中a上方是gm20541條件性敲除鑒定結果，wt表示野生型對照，條帶大小為223bp；het表示雜合子，有兩個條帶223bp和358bp；sixko表示純合子，條帶大小為358bp。圖4中a下方是six3－cre鑒定結果。six3－cre大小為200bp。根據圖4中a的結果，顯示所采用的鑒定方法可對新生小鼠的基因型進行有效鑒定。其中，gm20541基因敲除純合子小鼠即可作為視網膜色素變性疾病模型(后文用sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子)，并進行相關表型的驗證。(5)rt-pcr實驗分析six3-cre敲除小鼠視網膜中基因敲除效率驗證，方法如下：(a)分別分離野生型和突變型小鼠視網膜組織，置于，加入1mltrizol提取液，室溫20分鐘；(b)加入200μl氯仿，充分混勻，室溫靜置10分鐘；(c)將樣品置于4度離心機，10000轉離心15分鐘；(d)小心吸取上清液，加入等體積異丙醇，充分混勻，10000轉離心沉淀rna；(e)75％乙醇清洗析出的總rna，離心再次沉淀，然后晾干加入depc水溶解；(f)提取的總rna用cdna合成試劑盒(invitrogen,waltham,ma,usa)合成cdna。湖南小鼠動物模型