基因/蛋白質表達定性或定量檢測在進行分子檢測的過程中,保持核酸和蛋白質的完整性至關重要,因此在取樣過程中,應盡量避免核酸及蛋白質的降解。如不注意采樣過程,將會導致樣本中的核酸及蛋白質的無差別降解,嚴重影響后續分子檢測結果。在條件允許的情況下,組織樣本在離體后應立刻裝入凍存管內,并立即放入液氮中進行冷凍。在RNA提取樣本的保存過程中,可以選擇非冷凍型RNA保存液或Trizol試劑進行RNA酶的抑制。針對蛋白質提取樣本的保存,我們同樣可以使用商品化的蛋白酶抑制劑進行短期處理。聚合酶鏈式反應(PolymeraseChainReaction,PCR)及免疫印跡(Westernblotting,WB),這兩種實驗手段是分子生物學檢測中不可或缺的一部分,也是發表論文至關重要的分子檢測數據。PCR主要用來對基因在基因組層面或轉錄層面的變化進行定性或定量檢測,而WB則主要用來對某一蛋白質的表達進行定量檢測。(4)轉錄組學、蛋白質組學及代謝組學檢測隨著檢測水平及相關產業的不斷發展,各類組學檢測的價格降低,實驗設計中也常常運用組學檢測來提升實驗設計的檔次。在我們進行轉錄組學及蛋白質組學的檢測過程中,同樣是要首先確保目標RNA或蛋白質的片段完整性。LPS脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型。湖南裸鼠動物模型
皮膚淺II°及深II°燙傷大鼠模型一、服務信息1、動物模型名稱:皮膚淺II°及深II°燙傷大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:160-200g6、實驗動物環境:SPF級二、服務項目服務編號服務內容服務周期價錢DH2025皮膚淺II°及深II°燙傷大鼠模型1周詢價1、實驗方法:熱力致皮膚損傷法。麻醉大鼠,根據體重腹部備皮,然后固定于實驗臺上。將大鼠移近加熱純凈水的燒杯,將紗布條浸入熱水中,待水溫恒定于99℃時,取出紗布,立即平鋪于待燙部位,于紗布接觸大鼠皮膚后開始計時。致傷3s為淺II°燙傷,致傷10s為深II°燙傷。2、檢測標準:a.皮膚大體觀察:致傷3s大鼠局部皮膚發紅、輕微水腫。愈合后毛發生長良好,有少量紅褐**素沉著,皮膚輕微攣縮,表皮光滑;致傷10s大鼠局部皮膚發白、水腫。愈合后毛發生長良好,皮膚瘢痕形成,表面粗糙不平。b.皮膚組織病理學觀察:致傷3s大鼠表皮層次尚清楚,細胞明顯腫脹、變性,層次結構尚清楚,細胞核結構不清;致傷10s大鼠表皮細胞部分脫落,結構不清,明顯變性、壞死,部分細胞已溶解。三、交付標準:1.提供動物模型構建過程中的原始實驗記錄及數據圖片。西藏動物模型飼養小鼠腎纖維化(UUO)模型建立。
腹主動脈縮窄致心衰大鼠模型一、服務信息1、動物模型名稱:腹主動脈縮窄致心衰大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌性4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:180~220g6、實驗動物環境:SPF級二、服務項目服務編號服務內容服務周期價錢DH2015腹主動脈縮窄致心衰大鼠模型15周詢價1、實驗方法:采用主動脈縮窄法建立模型大鼠麻醉后,仰臥位固定、去腹毛、消毒,沿腹正中線切開皮膚及肌層,分離出腹主動脈,在腎動脈上方將腹主動脈與鈍頭8號探針一起結扎后,小心抽出針頭。手術造模后大鼠正常飼養3個月。大鼠終末體重(BW),心室重(VW),計算心體比(VW/BW),并進行心功能檢測,包括心率(HR)、左室收縮壓(LVSP)、左室舒張末壓(LVEDP)及左室最大壓力上升及下降速度(±dp/dtmax),并對心肌組織進行病理學檢測.2、檢測標準:模型組大鼠VW/BW明顯增加,LVSP明顯降低,LVEDP明顯升高,±dp/dtmax則**減小,與正常對照組相比具有統計學差異。病理學檢測結果表明心肌出現典型心衰樣病理改變。三、交付標準:1.提供動物模型構建過程中的原始實驗記錄及數據圖片。2.根據要求提供構建成功的模型動物或相關組織材料。四、服務項目說明:1、如有特殊要求,請另詢價。
然后再入固定液,但要注意防止組織損傷。要熟悉采集部位。要能準確的按解剖部位采集,如胰腺,一般取胰島較多的胰腺尾部;肺應取有細支氣管及帶有軟骨片的小支氣管部。如果實驗需進行多組織樣本的采集,采集順序應按照:消化,神經系統,皮膚,肌肉等的順序進行。選好組織塊的切面。熟悉某些組織成分安排,然后決定其切面的走向;如一長管狀以橫切面較好。切除不需要的部分。特別是組織周圍的脂肪等,應盡可能掉,否則給固定、脫水、浸蠟、切片等帶來一些不必要的問題。組織樣品的固定(1)固定的方法:①小塊組織固定法:從動物取下的小塊組織,立即置入液態固定劑(這是應用經常的方法)。②注射/灌注固定法:某些組織塊由于體積過大或固定液極難滲入內部或需要對整個臟器或整個動物進行固定,這時宜采用注射固定法,將固定液注入血管,經血管分支到達整個組織和全身,從而得到充分的固定。另,空腔組織比如肺,肺內含有空氣,固定液難以滲入,建議先做肺灌注,使得肺充盈滿固定液以后再進行保存,如果空腔中氣體沒有有效排出,后續可能影響固定效果(沒有灌注的肺組織會浮在液體表面不利于固定,切片以后也會看到很多的空泡)。③蒸汽固定法:比較細小而薄的標本。特發性肺纖維化(IPF)小鼠模型建立。
表明在gm20541敲除鼠視網膜外節變短退化。sixko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型小鼠;dapi(4,6-diamidino-2-phenylindole):細胞核染料4,6-二脒基-2-苯基吲哚;rhodopsin:視紫紅質抗體;merge:兩種顏色重疊。具體實施方式為使本發明實施例的目的、技術方案和優點更加清楚,下面將對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述。實施例中未注明具體條件者,按照常規條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者,均為可以通過市售購買獲得的常規產品。以下結合實施例對本發明的特征和性能作進一步的詳細描述。實施例11采用rt-pcr方法檢測gm20541基因在不同組織的表達情況。方法:分別提取小鼠腦、肝臟、視網膜、腸、肌肉、心臟、腎臟以及脾的總rna,然后用cdna合成試劑盒(invitrogen,waltham,ma,usa)合成cdna。根據gm20541的cdna序列設計引物:gm20541-cdna-f:5’-tcggtctcatcttcattccc-3;gm20541-cdna-r:5’-ggaaggctctgttccggtat-3。以提取的cdna為模板,進行rt-pcr。擴增后進行電泳,結果見圖1。結果見圖1中a和b,可以看出,通過rt-pcr方法檢測gm20541基因在小鼠腦、肝臟、視網膜、腸、肌肉、心臟、腎臟以及脾中的表達。通過截斷大鼠面部神經致面癱模型的建立。云南哪里有動物模型實驗室
致使腎小球系膜這以 IgA 為主的免疫復合物沉積,同時使系膜細胞增生,基質增多。湖南裸鼠動物模型
堿燒傷致角膜損傷大鼠模型一、服務信息1、動物模型名稱:堿燒傷致角膜損傷大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:160-200g6、實驗動物環境:SPF級二、服務項目服務編號服務內容服務周期價錢DH2020堿燒傷致角膜損傷大鼠模型1周詢價1、實驗方法:氫氧化鈉致大鼠角膜化學性損傷。大鼠用戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,用干棉棒拭去結膜囊多余液體,將統一規格直徑3mm的圓形濾紙片浸入1mol/LNaOH溶液中20s,飽和后取出置于干燥濾紙上1秒以吸去過多的堿液,將濾紙片貼敷于大鼠右眼角膜90s后移去,立即用滅菌水沖洗結膜囊及角膜2min。2、檢測標準:肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。三、交付標準:1.提供動物模型構建過程中的原始實驗記錄及數據圖片。2.根據要求提供構建成功的模型動物或相關組織材料。四、服務項目說明:1、如有特殊要求,請另詢價。2、雙方簽訂合同后,收取70%首付后啟動實驗。湖南裸鼠動物模型