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湖南大鼠動物模型技術

來源: 發布時間:2025-09-19

動物的選擇目前常用的模式生物有果蠅、酵母、小鼠、斑馬魚等。目前主要是小鼠黑色素瘤模型。造模方法黑色素瘤小鼠模型可分為誘發性模型、移植性模型、轉基因模型。一、誘導性模型應用:誘導的小鼠模型模擬人類受外界因素影響獲得的黑色素瘤,常用于研究預防黑色素瘤形成。1紫外線誘導的小鼠模型通過紫外線照射獲得的黑色素瘤模型被認為是臨床上可靠的模型。方法:有研究者將HGF/SFcDNA表達的小鼠置于日光燈下用不同劑量(kJ/m2UVB、kJ/m2UVA、)進行紫外誘導15min。模型驗證:誘導后的小鼠出現皮膚發紅,偶有淺表皮脫屑,在組織病理學中觀察到小鼠產生的大多數皮膚黑色素瘤中具有真皮成分,病變顯示具有垂直生長期或浸潤性惡性黑色素瘤以及淋巴結轉移,這些病變與人類患者黑色素瘤頁面狀擴散的表皮內病變特征相似。缺點:但野生型或正常型小鼠一般不易發生UV誘導的黑色素瘤,因此UV誘導的黑色素瘤小鼠模型往往需要聯合免疫缺陷小鼠,其操作技術較難、成本較高。2化學誘導化學致物誘導黑色素瘤小鼠模型大多采用DMBA和TBA誘導。DMBA是一種免疫抑制多環芳烴,其致機理是其活性代謝物被CYP450代謝成致物1,2-環氧化物-3,4-二醇DMBA,進而損傷DNA。TPA是通過蛋白激酶C充當啟動子。小鼠CLP盲腸穿孔致膿毒血癥模型。湖南大鼠動物模型技術

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40mmnaoh,),并在金屬浴100℃加熱1h;(3)取出離心管,冷卻至室溫后,加入100μl的中和液(40mmtris-hcl,),10000g離心2min后,取上清用于小鼠基因型鑒定。(3)pcr擴增:按照如系配置pcr反應體系2×taqmix:10μl尾巴組織裂解液:2μl引物1(gm20541-loxp-forward或six3-cre-forward):1μl(濃度:10mm)引物2(gm20541-loxp-reverse或six3-cre-reverse):1μl(濃度:10mm)ddh2o:6μl。引物序列如下:gm20541-loxp-forward序列:5’-attccccttcaagatagctac-3’;gm20541-loxp-reverse序列:5’-aatgatcaactgtaattcccc-3’;six3-cre-forward序列:5’-gccgccgggatcactctcg-3’;six3-cre-reverse序列:5’-ccagccgccgtcgcaactc-3’。擴增程序:pcr反應體系配制完后,在pcr儀上于95℃預加熱5分鐘使模板dna充分變性,然后進入擴增循環。在每一個循環中,先于95℃保持30秒鐘使模板變性,然后將溫度降到復性溫度58℃,保持30秒,使引物與模板充分退火;在72℃保持30秒,使引物在模板上延伸,合成dna,完成一個循環。重復這樣的循環25次,使擴增的dn段大量累積。,在72℃保持5分鐘,使產物延伸完整,4℃保存。(4)凝膠電泳稱取1g瓊脂糖放于100mltaebuffer中。西藏裸鼠動物模型技術C57BL/6成年鼠肺部通過呼吸機過量通氣損傷模型的建立;

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IgA腎病小鼠模型【目的】建立IgA腎病小鼠模型,并觀察模型的生化及病理指標特點。【材料】1、酸化水:鹽酸調滅菌水;2、蓖麻油+CCl4:5:1配制;3、LPS:;4、血清白蛋白BSA:800mg/kg用量,滅菌水配制;【方法】小鼠BSA+CCl4+脂多糖LPS誘導法1、20g小鼠牛血清白蛋白BSA(800mg/kg)隔天灌胃1次,配制160mg/ml,灌胃100ul/只,持續8周;2、同時皮下注射蓖麻油和CCl4(5:1),1次/周,持續8周;3、分別于第6、8周以()尾靜脈注射LPS,1次/周;4、每兩周取24h尿液一次觀察尿蛋白及紅細胞;5、每日觀察精神、飲食、大小便,第9周處死,取血和腎、肝做相應檢查;6、取尿液后2000r/min離心10min,取上清用全自動生化儀檢測尿蛋白肌酐比值,鏡下觀察尿沉渣中有無紅細胞。

脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型【方法】1、小鼠稱重,按體重計算藥物用量。2、脂多糖(LPS)藥物配制,生理鹽水溶解,根據小鼠體重配制終濃度為10mg/kg,200ul/只腹腔注射使用。3、抓取小鼠,捏緊小鼠頸背部皮膚,小拇指無名指疊加固定小鼠左下肢充分暴露小鼠腹部。4、小鼠的頭部向下,這樣腹腔中的就會自然倒向胸部,防止注射器刺入時損傷腸道。進針的動作要輕乘,防止刺傷腹部。5、注射器吸取準備好的藥物,腹腔左下部與身體呈45度角左右斜角進針注射LPS,注射完藥物后,輕微旋轉針頭退針,防止漏液。6、造模18h后處死小鼠解剖取組織進行組織病理學檢查。【檢測】肝組織有無:1、肝水腫;2、肝出血;3、炎性細胞浸潤;4、肝組織腫大等病理改變。再觀察肝損傷程度,各按程度積分為:0分為無該項病理改變;1分為病理變化輕且很局限;2分為病理變化中等且局限;3分為病變中等但或局部很;4分為非常的理改變。求出各動物的各項病理改變的總和,作為肝損傷程度積分。通過高脂飲食誘導構建非酒精性脂肪肝模型。

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技術實現要素:本發明的目的在于提供利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法和應用,采用該構建方法可以得到視網膜色素變性疾病模型,該模型可表現出視網膜色素變性性疾病特征,該模型可用于視網膜色素變性性疾病的研究,可以幫助闡明rp的發病過程及機制,并為該疾病的或預防提供新的靶標。本發明是這樣實現的:方面,本發明實施例提供了一種利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法,其包括:敲除目標動物視網膜前體細胞中的基因組中的gm20541基因。znf124是一種編碼鋅指蛋白的新基因。鋅指蛋白是一類具有手指狀結構域的轉錄因子,對基因調控起重要的作用。znf124蛋白可穿過核孔進入核內,作為轉錄因子調控其他基因的表達。目前針對znf124蛋白功能的研究報道并不多,對其功能也知之甚少,znf124與一種先天性系統發育疾病dandy-walker復合征(dandy-walkercomplex,dwc)相關。此外,znf124被認為參與了前體生長因子(vegf)對人造血細胞凋亡的抑制作用,表明znf124在人體生命活動中承擔有重要功能。發明人的另一研究表明,znf124基因突變與rp有關,對探索rp的致病機制有極大幫助。因此,深入研究znf124對視網膜色素變性疾病的及病因探討潛力巨大。可以簡化實驗操作和樣品收集。西藏實驗動物模型構建

采用復合改良法造模,是目前 IgA 腎病中較為可靠、穩定、成功率高,且病理、臨床指標近人類 IgA 腎病的動物模型。湖南大鼠動物模型技術

所述高原光照環境模擬裝置15包括可見暖光系統和照明亮度無極控制系統,所述可見暖光系統設置飼養倉2頂部。本實施例的工作原理:本系統集成了可見暖光系統(可模擬高原紅外線和紫外線)與照明亮度無極控制系統,需要燈光時,可通過燈光系統開啟紫外燈以及照明燈,并可根據所需實現亮度調節,通過日光燈加紫外線燈來實現高原高紫外線光照環境。實施例5在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統,所述高原溫度環境模擬裝置16包括降溫系統、升溫系統、溫控系統和溫度采集顯示系統。本實施例的工作原理:本系統配置降溫系統、升溫系統、溫控系統與溫度采集顯示系統使系統內溫度可無極調控,以保障海拔(3000m~7000m)高原溫度環境進行模擬,溫度調節通過冷暖風機來實現,就是和空調一樣的原理。實施例6在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統,所述高原濕度環境模擬裝置17包括加濕系統、除濕系統、濕度控制系統和濕度采集顯示系統。本實施例的工作原理:本系統配置加濕系統、除濕系統、濕度控制系統與濕度采集顯示系統使系統內濕度可無極調控,以保障海拔(3000m~7000m)高原濕度環境進行模擬。湖南大鼠動物模型技術