使得初學(xué)者或不熟練的實(shí)驗(yàn)人員在用爬片法制備原代細(xì)胞時(shí),會(huì)造成污染或?qū)嶒?yàn)器材(實(shí)驗(yàn)動(dòng)物)的浪費(fèi),損失人力,物力,財(cái)力。這就急需一個(gè)出色的一體式原代細(xì)胞爬片培養(yǎng)瓶來(lái)滿足上述實(shí)驗(yàn)需求。申請(qǐng)人根據(jù)多年的提取原代背根神經(jīng)節(jié)膠質(zhì)細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞的經(jīng)驗(yàn),創(chuàng)造性、開(kāi)拓性的設(shè)計(jì)了一種一體式原代細(xì)胞爬片培養(yǎng)瓶。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的為了解決現(xiàn)有培養(yǎng)瓶(皿)進(jìn)行原代細(xì)胞爬片培養(yǎng)存在的許多不便和不足之處,故提出一種操作方便,結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)合理,有助于爬片法制備原代細(xì)胞的培養(yǎng)瓶。為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用的技術(shù)方案:一種一體式原代細(xì)胞爬片培養(yǎng)瓶,包括瓶身,所述瓶身的其中一側(cè)端部設(shè)有爬片瓶頸和加樣口,瓶身的上端部設(shè)有外接圓柱,所述外接圓柱的頂端封閉、下端與瓶身連通,并且外接圓柱內(nèi)設(shè)有活動(dòng)圓盤(pán)和纖維圓盤(pán),所述活動(dòng)圓盤(pán)位于纖維圓盤(pán)的上方,活動(dòng)圓盤(pán)的四周外壁與外接圓柱的內(nèi)壁可滑動(dòng)接觸,并且在外接圓柱內(nèi)壁上設(shè)有用于限制活動(dòng)圓盤(pán)向上活動(dòng)的阻隔環(huán),同時(shí)在外接圓柱位于活動(dòng)圓盤(pán)上方的柱體上設(shè)有正壓口,所述纖維圓盤(pán)固定設(shè)置,并且在纖維圓盤(pán)內(nèi)可活動(dòng)穿插有連接桿,所述連接桿上端與活動(dòng)圓盤(pán)固定連接。SD大鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞,Rat Aortic vascular smooth muscle cells 貨號(hào):PC-R-18302。內(nèi)蒙古C57原代細(xì)胞服務(wù)
4、凍存的細(xì)胞該如何開(kāi)始培養(yǎng)?(1)將一管細(xì)胞從液氮罐中取出,注意保護(hù)手和眼睛。(2)將凍存管快速的放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),直到管內(nèi)物體完全融化。(3)將凍存管立即從水浴中拿出,擦干,轉(zhuǎn)入無(wú)菌環(huán)境。(4)用70%的酒精沖洗凍存管,然后擦去多余酒精。(5)打開(kāi)蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋(注意,由于凍存管有負(fù)壓,開(kāi)蓋時(shí)可能會(huì)有少量溢出,這是正常現(xiàn)象)。(6)用多聚賴(lài)氨酸(或參照說(shuō)明書(shū))包被培養(yǎng)瓶。多數(shù)細(xì)胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個(gè)細(xì)胞。(7)蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻。若需要?dú)怏w交換可打開(kāi)蓋子。(8)將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中(37℃,5%CO2,95%空氣)(9)放入培養(yǎng)箱后第6-16小時(shí)更換一次培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞。5、細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,多久更換一次培養(yǎng)基?這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。一般而言2-3天更換一次培養(yǎng)基,許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。注意:凍存細(xì)胞復(fù)蘇后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡的細(xì)胞。6、我能擴(kuò)增培養(yǎng)和再次凍存原代正常人類(lèi)細(xì)胞嗎?這取決于細(xì)胞的類(lèi)型。一些細(xì)胞類(lèi)型像神經(jīng)細(xì)胞,神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和一些生長(zhǎng)緩慢的上皮細(xì)胞。湖南模式原代細(xì)胞技術(shù)臍帶是哺乳類(lèi)連接胎兒和胎盤(pán)的管狀結(jié)構(gòu)。
導(dǎo)致集中消毒設(shè)計(jì)的紫外燈無(wú)法有效照射內(nèi)部空間,容易滋生細(xì)菌,影響細(xì)胞培養(yǎng)的存活率。因此,現(xiàn)有技術(shù)存在缺陷,需要改進(jìn)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本實(shí)用新型所要解決的技術(shù)問(wèn)題是:提供一種可存放大量細(xì)胞培養(yǎng)皿、空間利用率高、存放方便,具有殺菌消毒作用的新型原代細(xì)胞培養(yǎng)箱。本實(shí)用新型的技術(shù)方案如下:一種新型原代細(xì)胞培養(yǎng)箱,包括若干個(gè)用于存放細(xì)胞培養(yǎng)皿的內(nèi)箱盒、及用于存放所述內(nèi)箱盒的外箱體,所述外箱體內(nèi)設(shè)有若干列中空的矩形槽,各所述矩形槽的兩側(cè)分別設(shè)有若干層對(duì)稱(chēng)的滑槽,若干層所述滑槽由上至下等間距依次設(shè)置,每一層所述滑槽的正面及背面各存設(shè)有一內(nèi)箱盒,所述內(nèi)箱盒包括底盒、紫外燈及上蓋,所述紫外燈設(shè)于底盒內(nèi),所述底盒與上蓋的一側(cè)通過(guò)合頁(yè)鉸接,所述底盒與上蓋的另一側(cè)通過(guò)鎖扣扣合連接,所述底盒上設(shè)有推拉把手,所述底盒的兩側(cè)分別設(shè)有與滑槽適配的滑輪,所述底盒兩側(cè)的頭部分別設(shè)有與滑槽適配的滑塊。采用上述技術(shù)方案,所述的新型原代細(xì)胞培養(yǎng)箱中,所述滑槽的高度大于滑塊的高度,所述滑塊的高度大于滑輪的直徑。采用上述各個(gè)技術(shù)方案,所述的新型原代細(xì)胞培養(yǎng)箱中,所述鎖扣包括鎖環(huán)及鎖塊,所述鎖環(huán)與上蓋活動(dòng)連接,所述鎖塊設(shè)于底盒外部。
pricells-原代細(xì)胞分離試劑盒ii分離試劑盒編號(hào):iso-ii分離試劑盒適用:各種人和哺乳動(dòng)物組織的骨骼肌細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、心肌細(xì)胞、肺組織細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及滑膜細(xì)胞的分離。分離試劑盒規(guī)格:1分離試劑盒價(jià)格:¥1980分離試劑盒產(chǎn)地:中國(guó),pricells分離試劑盒特征:不含有hiv、hbv、hcv、細(xì)菌、支原體、、酵母;不含有內(nèi);不含有苯;不含有血清。生物安全級(jí):1級(jí)。運(yùn)輸條件:4oc。儲(chǔ)存條件:4oc,避光。用途范圍:只可用于科研。原代細(xì)胞分離試劑盒ii產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)一、主要適用骨骼肌細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、心肌細(xì)胞、肺組織細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及滑膜細(xì)胞。二、試劑盒組成1、buffera:100ml×24℃保存2、bufferb:50ml×24℃保存3、bufferc50ml×14℃保存4、bufferd:20ml×14℃保存5、buffere:20ml×14℃保存6、消化液i:2ml×24℃保存7、消化液ii:2ml×14℃保存三、使用方法注意:使用前請(qǐng)認(rèn)真閱讀說(shuō)明書(shū),按說(shuō)明書(shū)的要求對(duì)試劑進(jìn)行妥善保存。本試劑盒供用于5次組織的原代細(xì)胞分離,每次分離的組織約1g。取消化液i放入50mlbufferb中,放4℃保存。用完后,再新鮮配制。消化液ii放入50mlbufferc中,放4℃保存。1、取組織重約1g,放入無(wú)菌培養(yǎng)皿中,取1×pbs()清洗組織。根據(jù)您的需要可以提供經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的多克隆細(xì)胞系或者單克隆細(xì)胞系。
[1]細(xì)胞培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)條件1.培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基包含細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),包括碳水化合物、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素等。針對(duì)不同細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)需求,有多種合成培養(yǎng)基可供選擇,如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。2.其他添加成分在各種合成培養(yǎng)基提供基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之外,還需根據(jù)不同細(xì)胞和不同的培養(yǎng)目的添加其他成分,如血清、因子等。血清提供的是細(xì)胞外基質(zhì)、生長(zhǎng)因子和轉(zhuǎn)鐵蛋白等重要物質(zhì),常用的是胎牛血清。要根據(jù)不同的細(xì)胞和不同的研究目的決定添加血清的比例。10%~20%的血清能維持細(xì)胞較快的生長(zhǎng)增殖速度,稱(chēng)為生長(zhǎng)培養(yǎng)液;為維持細(xì)胞緩慢生長(zhǎng)或不死,添加2%~5%的血清即可,稱(chēng)為維持培養(yǎng)液。但血清中也存在有害于細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的物質(zhì),如補(bǔ)體、免疫球蛋白和一些生長(zhǎng)抑制因子;成分不明確,影響對(duì)結(jié)果的分析;不同動(dòng)物、不同批次的血清活性差別較大,影響培養(yǎng)效果的穩(wěn)定性。谷氨酰胺是細(xì)胞生長(zhǎng)重要的氮源,在細(xì)胞生長(zhǎng)代謝過(guò)程中起重要作用,但由于谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定容易降解,4℃下放置7天即可分解約50%,故谷氨酰胺需在使用前添加。為防止污染,培養(yǎng)基中還需添加一定量的常用名稱(chēng)、濃度及敏感性如下表。人臍靜脈血管平滑肌細(xì)胞分離自臍帶組織,是臍靜脈的重要結(jié)構(gòu)之一。寧夏原代細(xì)胞購(gòu)買(mǎi)
干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化是干細(xì)胞功能學(xué)研究的主要途徑。內(nèi)蒙古C57原代細(xì)胞服務(wù)
以避免衣服上掉落不明物體對(duì)細(xì)胞的污染。⑩實(shí)驗(yàn)操作時(shí)要注意及時(shí)更換巴斯德吸管、移液頭和移液管,切勿一根管子做到底。一旦發(fā)現(xiàn)接觸了非潔凈或者無(wú)法確定潔凈的物品必須直接丟棄。實(shí)驗(yàn)完畢應(yīng)及時(shí)收拾,保持實(shí)驗(yàn)室清潔整齊,用75%酒精清潔臺(tái)面。(4)防止細(xì)胞交叉污染①在進(jìn)行多種細(xì)胞培養(yǎng)操作時(shí),所用器具要嚴(yán)格區(qū)分,作上標(biāo)記便于辨別。按順序進(jìn)行操作,一次只處理一種細(xì)胞,多種細(xì)胞多種操作一起進(jìn)行時(shí)易發(fā)生混亂。②在進(jìn)行換液或傳代操作時(shí),粘有細(xì)胞的移液頭和移液管不要觸及試劑瓶瓶口,以免把細(xì)胞帶到培養(yǎng)基中污染其他細(xì)胞。③所有細(xì)胞一旦購(gòu)置,或從別處引入,或自己建立,必須及時(shí)保種凍存,一旦發(fā)生污染可重新復(fù)蘇細(xì)胞,繼續(xù)培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)急救秘籍!細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)常會(huì)遇到很多問(wèn)題,為解救細(xì)胞,就得對(duì)癥下藥才行。一般細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題的原因可以從5個(gè)方面來(lái)著手。只要抓住這5點(diǎn),救細(xì)胞就是小case。丟棄所有已經(jīng)污染的細(xì)胞和培養(yǎng)基;盡管病毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng),但生產(chǎn)疫苗是不安全的。初戀時(shí)遇見(jiàn)愛(ài)情哈羅,很開(kāi)心和大家見(jiàn)面了,接下來(lái)我們會(huì)陸續(xù)為你們推出有關(guān)science和subject方面的內(nèi)容,相信大家一定非常期待吧~呢。內(nèi)蒙古C57原代細(xì)胞服務(wù)