環(huán)境污染物對(duì)生態(tài)系統(tǒng)和人類健康構(gòu)成威脅。ELISA作為一種快速靈敏的現(xiàn)場(chǎng)篩查工具,在環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用:·檢測(cè)對(duì)象:o農(nóng)藥殘留:檢測(cè)土壤、水體(地表水、地下水)、農(nóng)產(chǎn)品中殘留的有機(jī)磷、有機(jī)氯、三嗪類、擬除蟲(chóng)菊酯等農(nóng)藥。常用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA試劑盒。o獸藥殘留:監(jiān)測(cè)養(yǎng)殖場(chǎng)廢水、地表水中***(如磺胺類、四環(huán)素類)和***殘留。o生物***:檢測(cè)水體(尤其是藻華期間)中的微囊藻***(Microcystins)、石房蛤***(Saxitoxin)等藻***;檢測(cè)糧食、飼料中的******污染。o重金屬:雖然ELISA不直接檢測(cè)金屬離子,但可開(kāi)發(fā)針對(duì)重金屬離子(如汞Hg2?、鎘Cd2?)螯合復(fù)合物的競(jìng)爭(zhēng)法ELISA,或檢測(cè)重金屬誘導(dǎo)產(chǎn)生的特異性蛋白(如金屬硫蛋白)。o環(huán)境***(內(nèi)分泌干擾物):檢測(cè)雙酚A(BPA)、烷基酚、鄰苯二甲酸酯類等具有雌***活性的化合物。競(jìng)爭(zhēng)法。o病原微生物指示物:檢測(cè)水體中大腸桿菌等糞便污染指示菌的特異性抗原。·應(yīng)用場(chǎng)景:污染源調(diào)查、環(huán)境質(zhì)量例行監(jiān)測(cè)、突發(fā)污染事件應(yīng)急響應(yīng)、污水處理廠出水監(jiān)測(cè)、飲用水安全篩查。比色法ELISA結(jié)果通常以450nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。廣東人ELISA試劑盒售價(jià)
血清和血漿是 ELISA 檢測(cè)中**常用的樣本類型,但它們的質(zhì)量易受溶血、脂血和纖維蛋白原的影響。溶血樣本中的血紅蛋白會(huì)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合辣根過(guò)氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AP)等顯色底物,導(dǎo)致吸光度異常升高,影響檢測(cè)準(zhǔn)確性。脂血樣本則可能因乳糜微粒的散射作用干擾光信號(hào)讀取。因此,采集時(shí)應(yīng)避免劇烈震蕩或高速離心,推薦使用低吸附**管,并在 2-8℃ 下 3000×g 離心 10 分鐘以去除雜質(zhì)。對(duì)于血漿樣本,抗凝劑的選擇也至關(guān)重要:EDTA 和枸櫞酸鈉適用于大多數(shù) ELISA 試劑盒,而肝素可能干擾某些抗原-抗體結(jié)合反應(yīng),需提前驗(yàn)證試劑盒的兼容性。遼寧牛ELISA試劑盒歡迎選購(gòu)嚴(yán)格的溫育時(shí)間和溫度控制是保證結(jié)果準(zhǔn)確的關(guān)鍵。
尿液樣本中的高鹽濃度和代謝產(chǎn)物可能引起基質(zhì)效應(yīng),通常需按試劑盒要求進(jìn)行 1:5 至 1:10 的稀釋,或使用緩沖液(如 PBS)調(diào)整 pH 值。腦脊液樣本蛋白含量較低,可能需要濃縮處理(如超濾離心)以提高檢測(cè)靈敏度。組織樣本(如肝臟、肌肉)需先勻漿并離心去除細(xì)胞碎片,上清液應(yīng)避免反復(fù)凍融,以防目標(biāo)蛋白降解。此外,某些樣本(如糞便或食品基質(zhì))可能含有抑制酶活性的物質(zhì),需通過(guò)固相萃取(SPE)或免疫親和柱純化目標(biāo)分子。短期儲(chǔ)存(<24 小時(shí))的樣本可置于 4℃,長(zhǎng)期保存則需分裝后凍存于 -20℃ 或 -80℃,避免反復(fù)凍融(超過(guò) 3 次可能***降低蛋白活性)。凍存前建議添加蛋白酶抑制劑(如 PMSF)以防止蛋白降解。實(shí)驗(yàn)前,樣本應(yīng)緩慢復(fù)溫(4℃ 過(guò)夜或室溫水浴),并充分混勻以確保均一性。
ELISA是臨床傳染病診斷領(lǐng)域的支柱技術(shù)之一,發(fā)揮著不可替代的作用:·病原體抗原檢測(cè):直接檢測(cè)患者樣本(血液、糞便、呼吸道分泌物等)中的病原體特異性抗原,用于早期診斷。例如:o乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、**抗原(HBcAg)。o人類免疫缺陷病毒p24抗原(HIVAg)。o輪狀病毒、腺病毒抗原(糞便)。o呼吸道合胞病毒(RSV)、流感病毒抗原(鼻咽拭子)。o隱球菌莢膜多糖抗原(血清、腦脊液)。·特異性抗體檢測(cè):檢測(cè)患者血清/血漿中針對(duì)病原體產(chǎn)生的特異性抗體(IgM,IgG,IgA),用于確定***狀態(tài)(急性期、恢復(fù)期、既往***)、免疫狀態(tài)評(píng)估和流行病學(xué)調(diào)查。例如:oHIV抗體篩查(Anti-HIV1/2)。o病毒性肝炎抗體(Anti-HCV,Anti-HAVIgM/IgG,Anti-HBc,Anti-HBs,Anti-HBe)。o梅毒螺旋體抗體(TPPA,TPPA)。o風(fēng)疹病毒、巨細(xì)胞病毒、弓形蟲(chóng)抗體(TORCH篩查)。o(SARS-CoV-2)抗體(Anti-N,Anti-S)。
ELISA可用于COVID-19抗體的大規(guī)模篩查。
·應(yīng)用:o糖尿病診斷與分型(胰島素、C肽)。o甲狀腺功能評(píng)估(TSH,FreeT3,FreeT4-后者常用化學(xué)發(fā)光)。o生殖內(nèi)分泌(LH,FSH,E2,P,PRL,睪酮)。o腎上腺功能評(píng)估(皮質(zhì)醇、ACTH)。o骨質(zhì)疏松相關(guān)(PTH,25-OHVitD)。o生長(zhǎng)發(fā)育評(píng)估(GH,IGF-1)。·優(yōu)勢(shì):靈敏度能滿足多數(shù)***檢測(cè)需求;特異性好(尤其使用單克隆抗體);高通量;成本適中。·挑戰(zhàn):o***存在結(jié)合蛋白(如皮質(zhì)醇結(jié)合球蛋白CBG,性***結(jié)合球蛋白SHBG),影響游離(有活性)***的檢測(cè)。一些ELISA檢測(cè)總***,一些則需專門(mén)方法測(cè)游離***。o***分泌有節(jié)律性(如皮質(zhì)醇的晝夜節(jié)律),采樣時(shí)間需標(biāo)準(zhǔn)化。o類固醇***結(jié)構(gòu)相似,抗體交叉反應(yīng)可能導(dǎo)致干擾。高靈敏度和特異性要求抗體質(zhì)量極高。o臨床主流正逐漸轉(zhuǎn)向自動(dòng)化程度更高、靈敏度更優(yōu)的化學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA)。某些病毒抗原檢測(cè)需在BSL-2實(shí)驗(yàn)室操作。中國(guó)香港魚(yú)ELISA試劑盒大概多少錢
實(shí)驗(yàn)時(shí)需穿戴防護(hù)裝備避免接觸終止液等腐蝕性試劑。廣東人ELISA試劑盒售價(jià)
食品安全關(guān)乎公眾健康。ELISA憑借其快速、靈敏、高通量、相對(duì)低成本的優(yōu)勢(shì),成為食品中危害因子(病原微生物、***、農(nóng)獸藥殘留、非法添加物、過(guò)敏原)檢測(cè)的重要工具。·檢測(cè)靶標(biāo)與模式:o食源***原菌及其***:沙門(mén)氏菌、大腸桿菌O157:H7、李斯特菌、金黃色葡萄球菌腸***等。常用夾心法檢測(cè)菌體抗原或***蛋白。o******(Mycotoxins):黃曲霉***B1(AFB1)、赭曲霉***A(OTA)、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON嘔吐***)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、伏馬菌素(FUM)等。多為小分子,采用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA。o農(nóng)藥殘留(PesticideResidues):有機(jī)磷、氨基甲酸酯、擬除蟲(chóng)菊酯類等殺蟲(chóng)劑;三嗪類、磺酰脲類除草劑等。競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)。o獸藥殘留(VeterinaryDrugResidues):***(如β-內(nèi)酰胺類、磺胺類、四環(huán)素類、氯霉素)、合成***(如己烯雌酚DES)、β-受體激動(dòng)劑(如克倫特羅,“瘦肉精”)等。競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)。o過(guò)敏原(Allergens):檢測(cè)食品中殘留的花生、牛奶、雞蛋、麩質(zhì)、堅(jiān)果、芝麻、甲殼類等過(guò)敏原蛋白,用于生產(chǎn)交叉污染監(jiān)控和成品檢測(cè)。夾心法。o非法添加物:如三聚氰胺(奶制品)、蘇丹紅(辣椒制品)等。競(jìng)爭(zhēng)法或夾心法(針對(duì)蛋白摻假)。廣東人ELISA試劑盒售價(jià)